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PEI转染流程避坑!293T、Expi293F与CHO-S的PEI瞬转优化

摘要:PEI瞬时转染广泛应用于重组蛋白、抗体及基因递送相关颗粒的体外表达,但不同宿主细胞在生长方式、核酸摄取能力、转染耐受性和蛋白表达周期方面存在明显差异,同一套参数并不适合直接用于293T、Expi293F和CHO-S等不同细胞体系。本文围绕三类常用表达细胞,整理贴壁与悬浮体系的PEI瞬时转染流程,重点分析转染前细胞密度、细胞活力、DNA用量、复合物制备、转染后换液或补料、温度调整和收获窗口等关键参数,并进一步梳理转染效率偏低、转染后细胞死亡、转染率正常但蛋白表达不足以及放大后产量下降等常见问题的排查思路,为重组蛋白和抗体从小规模验证到中等规模表达提供实验参考。

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